酿酒酵母ARD1对低温胁迫的响应及其互作蛋白的筛选
Response of Saccharomyces cerevisiae ARD1 to Low Temperature Stress and Its Screening of Interacting Proteins
摘要目的:低温发酵(10~15 ℃)可以提高葡萄酒的感官品质,有利于保留葡萄酒的品种香气和发酵香气,对改善葡萄酒品质具有积极的影响.为提高酿酒酵母的低温耐受性,本研究鉴定并分析了与酿酒酵母低温耐受相关的基因.方法:本实验室研究人员前期筛选得到1株低温耐受的本土酵母(ZX11),通过基因敲除、基因回补等技术,构建ZX11 △ard1和ARD1-ZX11△ard1突变体菌株,分析菌株在低温和正常温度下的生长状况.利用GST-Pull down联合质谱分析,酵母双杂交筛选并验证ARD1的靶标蛋白 结果:研究结果表明ARD1基因对ZX11的低温耐受性具有十分关键的作用.CBK1编码的Cbk1p蛋白是Ard1p的互作蛋白,并在体内和体外进一步验证Ard1p与Cbk1p存在互作.结论:本研究确定ARD1基因与ZX11酵母低温耐受的相关性,并证明Ard1p与Cbk1p蛋白之间存在互作,为深入研究ARD1基因的生物学功能及其对酿酒酵母低温耐受的分子调控机制奠定基础.
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