文蛤免疫活性肽酶解条件的优化及其活性研究

Studies on Optimization of Enzymatic Hydrolysis Conditions of Immunoactive Peptides from Meretrix meretrix Linnaeus and It's Activity

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摘要目的:采用酶解法制备文蛤中的免疫活性肽(MLIP),优化酶解条件,并对其免疫活性进行研究.方法:选用5种常用蛋白酶对文蛤进行酶解,以酶解液对RAW264.7细胞的增殖效果为评价依据,筛选最适蛋白酶.然后进行单因素实验,并选择影响较显著的3个因素,通过响应面法对酶解条件进行优化,用优化的工艺参数制备MLIP.最后,探究不同质量浓度MLIP对RAW264.7细胞相对增殖率、细胞形态及一氧化氮(NO)释放量的影响.结果:复合蛋白酶为最适用酶,优化得到的最佳酶解工艺参数为:pH 6.8、料液比1∶6.2、酶添加量3 493 U/g,45 ℃酶解3 h,预测得到的酶解产物对RAW264.7细胞的相对增殖率为71.40％,验证试验得到结果与之相近.当MLIP质量浓度为0.4mg/mL时,细胞相对增殖率最高,不同质量浓度的MLIP会引起细胞不同程度的分化且对NO的释放有一定促进作用.结论:以文蛤为原料制备的多肽具有较好的免疫活性.本研究可为文蛤免疫活性肽的制备及其进一步研究提供参考.