肉源隆德假单胞菌和致腐菌的混合生物被膜形成特征

Characterizations of Dual-biofilms Forming by Pseudomonas lundensis and Spoilage Bacteria from Meat

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摘要为探究肉类优势腐败菌群的混合生物被膜互作规律,采用结晶紫法、苯酚硫酸法、二喹啉甲酸法和激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察等分析在15 ℃和25 ℃肉源分离株隆德假单胞菌(PL)与3种致腐菌的混合生物被膜特性,及对蛋白酶和消毒剂耐受性的影响.结果表明,从腐败牛肉中分离鉴定的23株菌中,假单胞菌属占43.5％,其次为热杀索丝菌、不动杆菌属和类香味菌属.将优势腐败菌隆德假单胞菌与约翰逊不动杆菌、热杀索丝菌及类香味菌共培养,发现低温显著促进双菌混合生物被膜的形成.PL、AJ、BT在15 ℃时的生物被膜形成量均显著高于25 ℃时的,混合生物被膜在15℃时的形成量显著高于PL单培养的.PL与AJ共培养时,被膜菌数目比单培养时高0.75～0.78 lg(CFU/cm2),15℃共培养时,胞外多糖分泌量增加15.67～22.01 μg/mL,与AJ、BT共培养的胞外蛋白分泌量分别增加7.35,6.70 μg/mL.CLSM观察发现PL与MP或AJ混合生物被膜聚集团聚,形成不均一结构,被膜厚度增至48.99～49.22 μm.此外,混合生物被膜的形成,显著提高假单胞菌的蛋白酶活性和化学耐受性.经0.06％次氯酸钠处理后,15 ℃时PL与AJ、BT混合被膜残留率高达95.61％,96.16％,显著高于PL单培养.结论:肉源致腐菌PL与3种致腐菌形成结构复杂的混合被膜,在低温环境下被膜菌增强对次氯酸钠的抵抗性,为探究肉源腐败微生物混合被膜的污染和控制奠定良好的基础.