换一批嗜热烟曲霉SOD的性质表征及对毕赤酵母菌耐受性的影响
Characterization of a Thermostable Superoxide Dismutase form Aspergillus fumigatus and Its Influence on Multi-stress Tolerance in Pichia pastoris
摘要基于毕赤酵母的密码子偏好性及高效表达规律,对嗜热烟曲霉来源的超氧化物歧化酶afSOD基因进行优化,使GC含量由59％降至41％,CAI值由0.69优化为0.96,优化前、后基因序列一致性为73.8％.经测定,重组菌株诱导72h,酶活力可达213.78 U/mL.该重组酶AfSOD在pH 8.0和40℃条件下,具有最高催化活力,在中性环境和40～50℃稳定.金属离子Cu2+对该酶活性的促进作用尤为显著,5 mmol/L的Cu2+酶活提高80％,而Fe2+则表现出明显的抑制效应.重组酶AfSOD对DPPH和羟自由基具有明显的清除作用,分别达到(97.65±1.46)％和(89.48±2.53)％.此外,重组酶AfSOD的高效表达可显著增强酵母菌株对温度、渗透压、盐、乙酸和乙醇的耐受性.本研究不仅为超氧化物歧化酶高效制备提供了一定的技术支撑,也为增强酵母菌生产耐受性提供理论参考.
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关键词
超氧化物歧化酶密码子优化高效表达酶学性质耐受性superoxide dismutasecodon optimizationefficient expressionenzymatic propertiestolerance
栏目名称
DOI
10.16429/j.1009-7848.2025.01.005
发布时间
2025-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31901631）
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