酸性磷酸酶的生物信息学分析及抑制剂筛选
Bioinformatics Analysis and Inhibitor Screening of Acid Phosphatase in Rainbow Trout
摘要肌苷酸(IMP)是核苷酸降解过程中的重要物质,也是水产品鲜味的呈味物质之一,在酸性磷酸酶的作用下降解为次黄嘌呤核糖核苷(HxR)和次黄嘌呤(Hx),因此研究酸性磷酸酶的酶学特性和抑制其活性具有重要意义.基于生物信息学分析酸性磷酸酶的酶学特性,并采用虚拟筛选技术筛选酶的抑制剂.结果表明:酸性磷酸酶ACPI和ACPII分别含有488个和348个氨基酸,均为稳定的亲水蛋白.ACPI含有37个磷酸化位点和5个N-糖基化位点,而ACPII含有14个磷酸化位点和1个N-糖基化位点,两者均不含O-糖基化位点.ACPI存在一个跨膜结构域,不存在信号肽,亚细胞定位于质膜中,而ACPII不含跨膜结构域,含有1个信号肽,亚细胞定位于胞外基质中.ACPI和ACPII的二级结构中,无规卷曲和延伸链的含量较高.ACPI和ACPII的最适温度均为40℃,最适pH值均为5.0,米氏常数Km分别为0.23 mmol/L和0.14 mmol/L,最大反应速率vmax分别为1.04 μmol/(L·min)p-NP和1.06 μmol/(L·min)p-NP.筛选出表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、没食子酸和水杨酸5种抑制剂,ECG对ACPI和ACPII的抑制作用最强,IC50值分别为0.24mmol/L和0.27 mmol/L.本研究为通过靶向控制ACP活性来改善水产品风味提供理论依据.
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