基于分子对接研究汉麻仁肽DGDGSGFF的免疫增强作用
Studies on the Immune-enhancing Effect of Hemp Seed Peptide DGDGSGFF Based on Molecular Docking
摘要前期研究发现采用风味蛋白酶和木瓜蛋白酶复合水解法制备的汉麻仁多肽在RAW264.7巨噬细胞中具有体外免疫调节活性.本研究基于分子对接技术和长春瑞滨刺激的斑马鱼免疫抑制模型研究汉麻仁活性肽的免疫增强作用.利用Autodock软件筛选潜在的汉麻仁免疫肽,以灵芝孢子粉为阳性对照,荧光微球显微镜观察法比较不同浓度的汉麻仁活性肽对受精后3d(3dpf)的转基因斑马鱼体内巨噬细胞吞噬功能及尾静脉免疫细胞荧光强度的影响,用qRT-PCR法检测免疫相关基因的表达.结果显示,在9种候选汉麻仁肽中DGDGSGFF与TLR2和TLR4的结合能最低,分别为-10.166 kcal/mol和-10.569 kcal/mol.免疫抑制斑马鱼模型中,62.5~250 μg/mL的DGDGSGFF可显著上调免疫相关基因表达,其中62.5 μg/mL处理使IFN-γ、IL-12、TNF-α、Rag1和Rag2的mRNA表达水平分别提高至模型组的3.70,2.40,3.58,8.00和9.89倍(P<0.05).同时,该肽段可增强巨噬细胞吞噬功能(250 μg/mL组提升37.1%),并显著恢复免疫细胞数量:T细胞在125μg/mL组增加56.5%,中性粒细胞和巨噬细胞在250 μg/mL组分别增加46.8%和26.1%,综合表明DGDGSGFF具有显著的免疫增强作用.研究结果为阐明汉麻仁活性肽的免疫调节机制及汉麻仁功能性食品开发提供理论参考.
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