水产品中单核细胞增生李斯特氏菌快速检测方法的建立与应用
Establishment and Application of a Method for the Rapid Detection of Listeria Monocytogenes in Aquatic Products
摘要目的:基于多酶恒温快速扩增(MIRA)技术,建立水产品中单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的快速检测方法.方法:以Lm的iap特异性基因为靶基因,设计并筛选出适用于MIRA的引物和探针组合,对MIRA反应条件进行优化,并开展方法的特异性、灵敏度和重复性试验分析.结果:试验获得MIRA体系的最佳参数为40℃反应20 min,筛选出的引物探针组合具有较高的特异性,MIRA方法的检测灵敏度为3×102CFU/mL,与RT-PCR反应灵敏度相一致,且检测结果重复性好、稳定性强,在大连地区80份水产品样本中,Lm阳性检出率为2.50%.结论:研究建立的MIRA方法可准确、高效地检测水产品中Lm,为现场快速检测食源性致病菌提供新的技术方法,及时发现和控制水产品被Lm污染的潜在风险,达到预警前移的重要作用.
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