坛紫菜R-藻红蛋白的提取纯化及草甘膦检测应用
The R-Phycoerythrin Extracted and Purified from Porphyra haitanensis and the Application of Detecting Glyphosate
摘要目的:草甘膦是一种常见的除草剂,常残留于水体中,对环境和人体产生危害,开发高效且准确的检测方法,测定水体中的草甘膦含量有重要意义.本研究基于坛紫菜中的R-藻红蛋白设计一种荧光开启型探针,用于水中草甘膦的检测.方法:通过冻融循环和超声破碎提取坛紫菜中的藻红蛋白并进行纯化.肽指纹图谱、吸收光谱和SDS-PAGE测定结果表明,该产物为R-藻红蛋白.本研究方法获得的R-藻红蛋白纯度高达 4.96,达到分析纯级.进一步研究发现,提取的R-藻红蛋白对Cu2+离子表现出优异的特异性荧光响应性.基于该特性设计一种基于铜离子猝灭R-藻红蛋白荧光的探针,利用草甘膦与铜离子螯合的特性实现对草甘膦的检测.结果:该探针的荧光信号与草甘膦浓度呈现良好的线性关系,其最低响应值为 443.4 μg/L,远低于国标《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2022)中草甘膦残留物质量浓度的最大限度(0.7 mg/L).将该探针用于 2 种实际水样中草甘膦含量的加样回收检验,检出不同含量的草甘膦.结论:本研究为高纯度R-藻红蛋白提取提供了新思路,为检测水体中草甘膦残留提供了一种新方法,具有一定的科学意义和应用价值.
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