抗PEA受体结合区单克隆抗体的制备及鉴定
Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies Against PEA Receptor Binding Subuni Protein
摘要目的:探讨绿脓杆菌外毒素A(PEA)中和性单克隆抗体在预防和治疗绿脓杆菌感染中的免疫保护作用.方法:以重组绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白免疫Balb/c小鼠,将免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA方法筛选细胞培养上清,采用有限稀释法对阳性孔进行克隆,3次克隆后获得4株能稳定分泌抗PEA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1C4,1D4,2E12和3C6.结果:细胞培养上清ELISA效价为4000~8000,腹水ELISA效价可达25600~51200,其中3C6抗体在细胞上的中和试验显示具有较高的中和效价,其亲和常数为8.93×108.结论:获得的单克隆抗体可在抗烧伤绿脓杆菌感染中发挥重要作用.
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