换一批
换一批表达barnase基因的重组棉铃虫核型多角体病毒的构建及其杀虫活性研究
Construction of a Recombinant Heliothis armigera Nuclear Polyhedrosis Virus Expressing Barnase Gene and its Pest-killing Activity
摘要将含有barnase基因与杆状病毒多角体基因(ph)的重组转座载体pFb-Bar在大肠杆菌中与含有棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)的穿梭戴体Hanpvid转座并提取重组穿梭载体DNA转染棉铃虫细胞，得到重组棉铃虫病毒rHa-Bar.其分子杂交证明，昆虫细胞中有rHa-Bar的bar基因转录本存在，并能表达产生33 kD的多角体蛋白和12 kD的barnase.在平板上，barnase能降解RNA，出现清晰的降解图.rHa-Bar对三龄棉铃虫幼虫的毒力比野生型HaNPV的LD50减少20％，LT50减少30％.用barnase的拮抗基因barstar构建了具有Neo抗性、并能稳定表达barstar的棉铃虫转化细胞AMl-NB.以携带barnase基因的重组病毒rHa-Bar分别感染转化细胞和正常细胞，48 h子代病毒在转化细胞中的产量比在正常细胞中高23倍，72 h高160倍.
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