换一批
换一批B→O血型转变工具酶α-半乳糖苷酶cDNA克隆及表达
Cloning and Expression of Alpha-galactosidase cDNA for Seroconversion from Group B to O
摘要α-半乳糖苷酶是实现B→O血型转变、制备通用型血的关键工具酶.利用反转录PCR方法从中国海南Catimor咖啡豆中克隆α-半乳糖苷酶cDNA,插入嗜甲基酵母P.pastoris分泌表达栽体pPIC9K中,转化P.pastoris GS115,筛选高表达重组茵株.经甲醇诱导表达7 d后,发酵液总蛋白分泌量约1.2 mg/ml,SDS-PAGE呈现约41 kD特异表达带,与专一性底物对-硝基-苯基-a-D-吡喃半乳糖苷反应证明,表达产物具有α-半乳糖苷酶活性,最高达到18 U/ml.初步实验表明,表达的α-半乳糖苷酶可酶解B型红细胞,成功实现B→O血型转变.
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分类号
Q78
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2000.04.004
发布时间
2004-01-08
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)（102-09-04-02）
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