摘要为研究tRNATrp与色氨酰-tRNA合成酶(TrpRS)的相互识别及其结构与功能的关系,纯化了枯草杆菌TrpRS,并用溴化氰活化的Sepharose 4B将TrpRS固定化,固定化TrpRS的蛋白回收率为95.5%,活力回收率为31.3%.研究了固定化TrpRS的酶学性质,其热稳定性和贮存稳定性方面均比液相TrpRS有了较大的提高,最适温度、最适pH均有一定程度的增大,工作稳定性良好.以固定化TrpRS为亲和层析介质,对含有20个核苷酸随机序列,长度为56个核苷酸的单链RNA随机库进行了三轮筛选.实验结果表明,固定化TrpRS可以作为SELEX亲和层析介质,进行模拟tRNATrp分子的RNA随机库的SELEX筛选.
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