换一批cAMP对转化细胞中几种基因表达及CREB DNA结合活性的影响
The Effect of cAMP on Expression of Several Genes and CREB DNA Binding Activity in Transformed C3 H10T1/2 Cells
摘要从癌基因、抑癌基因及转录因子CREB(cAMP反应序列结合蛋白)对CRE DNA序列结合活性的相关性,对db-cAMP处理的小鼠C3H10T1/2转化细胞增殖抑制作用进行了研究.实验结果表明,转化细胞中PKA(蛋白激酶A)活性显著低于正常细胞,而PKC(蛋白激酶C)活性则显著高于正常细胞.斑点印迹和Northern印迹分析显示转化细胞中c-myc和CaM(钙调素)基因表达明显高于正常细胞,而p53基因和Rb基因表达则明显低于正常细胞,这些差别与C3H10T1/2转化细胞增殖失控有关.转化细胞经db-cAMP(1 mmol/L)处理后,细胞增殖受到明显抑制,db-cAMP处理0.5 h后,转化细胞中PKA活性便明显增强,PKC活性则被显著抑制,处理2 h后,c-myc和CaM基因表达下降,而p53和Rb基因表达则增强,这些变化与cAMP抑制C3H10T1/2转化细胞增殖有密切联系.凝胶阻滞电泳分析显示db-cAMP(1 mmol/L)处理短时间内,CREB对CRE DNA序列无结合活性,12 h后开始出现较弱的结合活性,24 h后才明显加强,表明在db-cAMP处理的早期,调控区中含有CRE序列的基因不参与db-cAMP对细胞增殖抑制的调节,即与CREB磷酸化及其相应的DNA结合活性无相关性.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2001.01.018
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（39370355）
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