换一批
换一批21Ala定点突变胰高血糖素及结构与功能变化
Changes of Glucagon Structure and Function by 21Ala Site-Directed Mutagenesis
摘要胰高血糖素是由29个氨基酸组成的多肽激素，具有促糖元分解的生理功能，其拮抗剂有治疗糖尿病病人的潜在应用价值.在获得重组胰高血糖素基因工程菌基础上，利用定点突变技术改造其第21位氨基酸天冬氨酸为丙氨酸，并经DNA测序证明胰高血糖素基因发生了点突变.用IPTG诱导表达后，经亲和层析和反相高效液相层析，纯化到突变型重组21Ala-胰高血糖素.质谱测定分子量与理论值相符.利用园二色谱比较重组胰高血糖素和突变的21Ala-胰高血糖素在TFE中的二级结构，发现胰高血糖素以α螺旋为主要二级结构，21Ala-胰高血糖素仍有α螺旋结构特征，并且含量有所增大.利用兔升血糖试验，发现21Ala-胰高血糖素生物活性比重组胰高血糖素减少51％(P＜0.01).显示天然胰高血糖素第21位氨基酸天冬氨酸与形成α螺旋结构关系不大，但在发挥胰高血糖素的生物功能中有重要作用，与其可作为钙离子结合位点，参与胰高血糖素和受体结合的潜在功能密切相关.
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DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2001.03.012
发布时间
2004-01-08
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