换一批大鼠bcl-xL cDNA的克隆和高滴度重组bcl-x L/腺相关病毒的制备
Cloning of Rat bcl-xL cDNA and Production of Large Amount of Highly Purified Recombinant bcl-xL/AAV
摘要以RT-PCR法从大鼠脑组织中克隆bcl-XL基因,将其定向插入带rep-cap基因和neu基因的三功能腺相关病毒(AAV)载体,转染HeLa细胞并以G418筛选,然后用腺病毒感染筛选后的细胞克隆,包装成重组腺相关病毒.用带rep-cap基因的C12细胞筛选和滴定产生重组腺相关病毒的细胞克隆,粗制细胞裂解物中病毒滴度最高只有3×105IU/ml.从产病毒量较高的克隆大量制备重组病毒,经肝素柱高压液相亲和层析法纯化、浓缩病毒后获得了高达4×1011IU/ml的重组病毒.为研究脑缺血动物模型中BCL-XL的抗脑细胞凋亡作用打下了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2001.04.012
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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