八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及其生化性质
Purification and Characterization of Two Luffaculins, Ribosome-inactivating Proteins from Seeds of Luffa acutangula
摘要通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM-52纤维素阳离子交换层析、反相毛细管液相色谱(re-verse-phase capillaryliquid chromatography,RP-CLC)等步骤,从八棱丝瓜籽中分离到2种单链核糖体失活蛋白luffaculin-1和luffaculin-2.在SDS-PAGE和IEF上均显示为单一条带,表观分子量均为28kD,其等电点分别为8.86(luffaculin-1)和9.05(luffaculin-2).实验表明,它们具有RNA N-糖苷酶活性.蛋白质合成抑制活性测试表明,它们对蛋白质合成具较强的抑制作用.体外抑制肿瘤细胞生长活性检测表明,luffaculin-1和luffaculin-2对人白血病细胞株K562有较强的毒性,IC50分别为1.1×10-6mol/L和2.0×10-7mol/L.八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白具有可以用于或构成免疫毒素治疗癌症的应用前景.
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