换一批OS-9基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备
The Fusion Expression and Purification of OS-9 Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibody
摘要OS-9基因广泛表达于人体多种组织,该基因的表达产物可能与肿瘤的发生相关.为获得可溶性表达的OS-9蛋白,制备多克隆抗体,深入了解OS-9基因的功能,将OS-9基因片段克隆入组氨酸标签融合的表达载体pET28a中,IPTG 诱导,利用金属螯合亲和层析(MCAC)进行纯化,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度与含量.免疫家兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA法检测抗体效价,Western印迹检测抗体特异性.经表达形式分析证明,融合蛋白大部分可溶.薄层扫描分析纯度可达90%以上,Bradford法检测蛋白浓度约0.1 mg/ml.抗血清效价可达1∶3 200以上,Western印迹检测证明抗体特异性良好.经诱导表达及纯化制备出可溶的纯度较高的OS-9蛋白产物,并获得高效价特异性良好的多克隆抗体.
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DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2003.03.010
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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