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细胞间粘附分子1特异结合肽的筛选及其生物功能

Screening of ICAM-1-binding Peptide and Their Biological Functions

摘要采用两种方法对噬菌体展示随机十五肽库进行亲和淘选.EuSA法筛选特异结合高亲和力的阳性噬菌体单克隆,测序,得到6个与人细胞间粘附分子1(ICAM-1)高亲和力的噬菌体展示十五肽单克隆.再经EuSA法从这6个噬菌体单克隆中选择与ICAM-1亲和力最高的单克隆,同时利用蛋白空间结构位象模拟技术对小肽与ICAM-1的亲和力进行模拟研究.最终获取目的小肽的氨基酸序列为GRGEFRGRDNSVSVV.目的单克隆噬菌体与ICAM-1的亲和常数Ka为7.87×107 L/mol.体外合成、纯化并标记目的小肽.EKUSA法验证目的小肽与人ICAM-1的结合呈浓度依赖性,抗ICAM-1多抗不能拮抗目的小肽与ICAM-1的结合.采用免疫组化方法证实,此目的小肽具有与炎症组织中高表达的ICAM-1特异性结合的功能.在动物体内,荧光标记的目的小肽具有向高表达ICAM-1的炎症部位特异性聚集的功能.说明此目的肽可尝试作为以ICAM-1为靶的"肽导向药物"的前导肽.

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