热休克因子1对内毒素所致G-CSF基因表达的影响

Effect of Heat Shock Factor 1 on LPS-induced Expression of Granulocyte-colony Stimulating Factor in Macrophage in vitro

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摘要为探讨热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)活化和过表达对内毒素(endotoxin,ET)所致粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF)基因表达的影响,采用大肠杆菌内毒素即脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理RAW264.7巨噬细胞,并通过热休克预处理诱导HSF1活化,采用Western印迹检测HSP7O的表达观察HSF1的活化情况,RT-PCR检测热休克反应(heat shock response,HSR)对G-CSF mRNA表达的影响;构建HSF1的pcDNA3.1真核表达质粒,采用脂质体转染法建立HSF1过表达RAW264.7巨噬细胞株,用免疫细胞化学和Western印迹观察HSF1的表达,RT-PCR及Northern印迹进一步研究HSF1对G-CSF基因表达的可能影响.发现:LPS诱导巨噬细胞中G-CSF mRNA表达增多,并随时间的延长,表达量逐渐增加;与单纯内毒素处理组相比,热休克预处理后,LPS诱导的巨噬细胞G-CSF mRNA的表达明显被抑制;建立的稳定表达HSF1的RAW264.7细胞株中有HSF1蛋白的核移位;HSF1过表达可明显抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞G-CSFmRNA的表达.上述结果表明:热休克预处理能抑制LPS诱导的巨噬细胞G-CSF mRNA的表达;HSF1过表达可抑制内毒素诱导的巨噬细胞G-CSFmRNA的表达.