换一批一种用于基因芯片可靠的双轮RNA线性扩增技术
Optimization of Two-cycle T7-based RNA Amplification System for Oligonucleotide DNA Microarray
摘要DNA微阵列能在一次实验中检测成千上万个基因的表达情况,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标.但常规方法需要大量RNA,因而基于T7 RNA线性扩增技术逐渐成为微阵列表达谱实验中最常用的探针制备方法.本方法将实验步骤进一步改进,增加额外的一轮体外转录,并结合Klenow酶标记技术来制备cDNA靶标和寡核苷酸芯片杂交.从纳克量级的总RNA起始,本方法和常规的RNA单轮线性扩增法相比,仍然准确地保留了约70%的基因表达信息.同一RNA样本的自身比较实验及重复实验结果也显示,该方法具有较高的可靠性和重复性.RNA双轮体外扩增法需要的起始RNA相对于常规的单轮扩增法减少了很多(10 ng甚至更少),因而非常适合分析那些只能提供微量RNA的样本.
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DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2006.06.012
发布时间
2006-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
高比容电子铝箔的研究开发与应用项目（2002AA222011）
国家高技术研究发展计划（863计划）（39889001,39825108）
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