换一批
换一批一种鉴定MNSs红细胞血型单克隆抗体类型的方法的建立
Establishment of a Method Used in Identification of the MNSs Blood Group Monoclonal Antibody
摘要为鉴定MNSs血型单克隆细胞株6D7C9分泌的抗体类型,通过克隆、亚克隆、细胞转染等分子生物学技术建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,并将其作为抗原,通过ELISA、Western印迹法确定6D7C9分泌的McAb.结果显示,RT-PCR技术成功克隆获得了GPA、GPB血型糖蛋白编码基因,通过分别构建其重组逆转录病毒表达载体pEGZ/GPA及pEGZ/GPB,转染包装细胞293T,再感染L929细胞,经zeocin筛选2周后,RT-PCR及流式细胞仪分析证实,L929/GPA和L929/GPB转基因细胞中分别有GPA、GPB目的基因的转录和蛋白表达.用稳定高表达GPA、GPB的转基因细胞通过ELISA和Western印迹法证实单克隆细胞株6D7C9分泌的是抗GPA/GPB McAb.本研究成功地建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,为MNSs血型McAb的检测及GPA、GPB蛋白的功能学研究奠定了基础.
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主题词
血型糖蛋白(Glycophorin)抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)血型抗原(Blood Group Antigens)细胞(Cells)红细胞(Erythrocytes)
分类号
Q592.1
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2007.05.016
发布时间
2007-06-25
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