酵母双杂交筛选与蛋白激酶CK2α'相互作用蛋白——泛素-52氨基酸融合蛋白的鉴定
Identification of Ubiquitin-52 Amino Acid Fusion Protein as Interacting Partner of Protein Kinase CK2 α' Subunit by Two-hybrid Screening
摘要蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶.为研究CK2α'亚基在精子发生中的作用机制,将构建于pACT2质粒的人睾丸cDNA文库和人蛋白激酶CK2α'为诱饵蛋白进行酵母双杂交实验.以初步筛选与人蛋白激酶CK2α'相互作用蛋白的阳性候选克隆,筛选获得8个阳性克隆,其中1个与人泛素-52氨基酸融合蛋白基因(UBA52)的cDNA序列有高度同源性(100%).GST pull-down实验在细胞外进一步证实了CK2α'与UBA52之间存在相互作用.本实验证明,人泛素-52氨基酸(UBA52)融合蛋白是人CK2α'亚基的相互作用蛋白,它们之间的相互作用对精子发生机制的影响尚不清楚,进一步分子机制研究正在进行中.
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