摘要B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1,BMI-1)在多种恶性肿瘤中高表达.为探索BMI-1在宫颈癌发生发展过程中的生物学作用,将构建成功并已鉴定为有效序列的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体BMI-1shRNA2和BMI-1 shRNA4,转染人宫颈癌细胞系HeLa并筛选稳定转染细胞株,Western印迹检测BMI-1蛋白表达,实时荧光定量RT-PCR检测周期素依赖性激酶抑制剂p16~(INK4a)(cyclin-dependent kinase inhibitor p16~(INK4a))、人类端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、同 源盒A9(homeobox A9,HOXA9)、同源盒B4(homeobox B4,HOXB4)和同源盒C13(homeobox C13, HOXC13)基因mRNA的表达变化,PI染色流式细胞仪检测细胞周期变化.结果表明,在稳定转染BMI-1 shRNA2、BMI-1 shRNA4的HeLa细胞中,显著抑制BMI-1蛋白表达,上调p16~(INK4a)、HOXA9和HOXC13三者mRNA表达,而hTERT和HOXB4两者mRNA的表达水平无明显改变,同时G_1期细胞增加、S期细胞减少,提示敲减BMI-1表达诱导HeLa细胞G_1期阻滞,BMI-1可能是宫颈癌基因治疗的靶分子.
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