换一批三维回转骨细胞条件培养基对成骨细胞功能的调节作用
Regulating Role of Conditioned Medium of Osteocytes Subjected to 3-D Rotation on Functions of Osteoblasts
摘要骨细胞是骨组织中主要的力学感受器.研究失重条件下骨细胞对效应细胞的调控作用对于揭示失重引起的骨丢失机制具有重要意义.本研究拟采用三维回转器模拟失重,探讨模拟失重骨细胞条件培养基(RCM)对成骨功能的调节作用.小鼠骨细胞系MLO-Y4三维回转培养72 h后,收集回转条件培养基(RCM)和未回转对照组的条件培养基(CCM),用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、对硝基苯磷酸(pNPP)法和流式细胞术(FCM)分别检测RCM对小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1增殖、周期及细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.采用RT-PCR方法检测RCM对MC3T3-E1成骨相关基因表达的影响.结果显示,三维随机回转72 h后的MLO-Y4 RCM可促进MC3T3-E1增殖:条件培养基培养MC3T3-E1 24 h和48 h后,50%RCM组比CCM组分别增加了1.62和1.60倍,差异显著(~*P<0.05),培养72 h后,100%RCM组比CCM组增加了1.69倍,差异显著(~*P<0.05);细胞周期检测结果表明,条件培养基培养24、48和72 h后,RCM组部分恢复CCM引起的MC3T.3-E1细胞周期阻滞;MC3T3-E1的ALP活性在RCM组和CCM组之间无差异;RT-PCR检测结果表明,100%MLO-Y4条件培养基培养MC3T3-E1 48 h后,降低了成骨相关基因ALP、Runx2、OPN、OC的表达.差异显著(~*P<0.05,~(**)P<0.01,~(***)P<0.001).实验结果表明,三维随机回转模拟失重培养骨细胞72 h后的条件培养基促进了成骨细胞增殖,抑制了成骨相关基因表达.
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关键词
骨细胞条件培养基成骨细胞三维回转成骨功能conditioned medium of osteocytesosteoblasts3-D rotaitonfunctions of osteoblasts
分类号
R851.22（航空航天医学）
栏目名称
发布时间
2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30970689）
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