换一批古DNA实时荧光定量PCR实验中标准品的制备
The Preparation of Standard Samples for the Real Time Amplification of Ancient DNAs
摘要实时荧光定量PCR技术通过对PCR每一循环扩增产物的实时检测,可对模板的精确拷贝数进行绝对定量,从而用于古DNA实验中提取和扩增条件的比较和优化.本研究采用异硫氰酸胍碱裂解-SiO2吸附的方法,从采自黑龙江省的晚更新世斑鬣狗化石材料中提取得到了斑鬣狗线粒体基因组古DNA.经常规PCR扩增后,将纯化的扩增产物克隆到微生物体内使其大量复制,再用M13通用引物扩增出含少量外源DNA的古DNA目标片段,从而建立了适用于古DNA荧光定量PCR扩增的标准品的制备方法.经检测分析,运用该方法制备的标准品性质稳定,能够准确地指示反应体系中较为精确的古DNA模板拷贝数,从而反映古DNA的提取和扩增效率,用于比较并优化古DNA提取和扩增条件.
更多相关知识
分类号
Q52（核酸）
栏目名称
发布时间
2010-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（(40902008&40672006)）
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（(CUG090103)）
中国科学院脊椎动物进化系统学重点实验室开放课题基金（(2010LESV009)）
- 浏览0
- 被引6
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
