摘要免疫荧光染色(immunofluorescent staining,IF)技术广泛用于细胞或组织内抗原定性、定量或定位检测.然而,依常规染色步骤操作,在有些胞核抗原的检测中很难得到令人满意的结果.有研究者采用盐酸酸化预处理用于细胞增殖标记物5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)的荧光染色并获得良好效果.但此方法是否也适用于其他类型的胞核抗原,尚不清楚.为系统全面分析盐酸酸化在胞核抗原免疫荧光染色中的作用,本文以成年C57BL小鼠主要嗅觉表皮(MOE)为材料,分别对Ki-67、5-甲基胞嘧啶(5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)三种不同类型的胞核抗原进行盐酸酸化处理免疫荧光染色.结果显示,当血清封闭和抗体浓度等条件一致时,室温下盐酸酸化2h,Ki-67的染色效果最佳,而阴性对照与未酸化组均未出现阳性信号;同样经过盐酸处理2h,5mC和5hmC染色也呈现较强的阳性信号.该研究表明,在一些胞核抗原免疫荧光染色中,使用盐酸酸化处理可显著提高染色效果.
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