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第一类肽链释放因子C端结构域参与调控终止密码子的识别过程

C-terminal Minidomain of eRF1 Modulates the Process of Stop Codon Decoding

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摘要真核生物蛋白质翻译终止过程中,第一类肽链释放因子(eukaryotic polypeptide release factor,eRF1)利用其N端结构域识别终止密码子.eRF1的N结构域中的GTS、NIKS和YxCxxxF模体对于终止密码子的识别发挥重要作用.但至目前为止,eRF1识别终止密码子的机制,尤其是对于终止密码子的选择性识别机制仍不清楚.我们构建了四膜虫(Tetrahymena thermophilia)eRF1的N端结构域与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)eRF1的M和C结构域组成的杂合eRF1,即Tt/Sc eRF1和Tt/Sp eRF1.双荧光素酶检测结果证实,两种杂合eRF1在细胞中识别终止密码子的活性具有显著差异.Tt/Sc eRF1仅识别UGA密码子,与四膜虫eRF1一致,具有密码子识别特异性;而Tt/Sp eRF1可以识别3个终止密码子,无密码子识别特异性.为解释这一现象,将Sp eRF1的C结构域中的1个关键的小结构域中的氨基酸进行突变,与Sc eRF1相应位点的氨基酸一致.分析结果显示,突变体Tt/Sp eRF1识别密码子UAA和UAG的性质发生显著变化,说明第一类肽链释放因子的C端结构域参与了终止密码子的识别过程.这提示,四膜虫eRF1识别终止密码子的特异性可能依赖于eRF1分子内的结构域间相互作用.本研究结果为揭示肽链释放因子识别终止密码子的分子机制提供了数据支持.

作者闫静 ^[1] 石文鑫 ^[1] 王美 ^[1] 申泉 ^[1] 柴宝峰 ^[1] 学术成果认领

作者单位化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西大学生物技术研究所,太原030006 ^[1]

关键词肽链释放因子终止密码子识别 C端小结构域四膜虫eRF1 polypeptide release factor stop codon recognition C-terminal minidomain of eRF1 Tetrahymena eRF1

分类号 Q786（分子生物学基因工程《遗传工程》）

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研究论文

DOI 10.13865/j.cnki.cjbmb.2017.02.12

发布时间 2017-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（(No.31172078.31540054)）山西省回国留学人员科研资助项目（(No.2014-重点1)） Supported by National Natural Science Foundation of China （(No.31172078.31540054) and Research Project Supported by Shanxi Scholarship Council of China(No.2014-major project 1)）