UV-B辐射对颠茄氮代谢及次生代谢产物含量的影响
Effects of UV-B on the Activities of Nitrogen Metabolism and Secondary Metabolites of Atropa belladonna
摘要有害的中波紫外线(ultraviolet B,UV-B;280~320 nm)辐射影响植物的生长与发育.但也有研究证明,UV-B辐射可诱导生物碱合成.然而,UV-B辐射能否提高颠茄(Atropa belladonnaL.)中托品烷类生物碱(tropane alkaloids,TAs)的含量尚未见报道.本研究以颠茄实生苗为材料,研究UV-B不同照射度强、时间(d数)对颠茄的氮代谢、生物碱含量及TAs代谢途径中的几个关键酶基因表达量的影响.结果表明,随着辐射天数的增加(5 ~30 d),低强度(LU,5μW/cm2) UV-B处理与对照(无辐射)比较,硝态氮、莨菪碱、东莨菪碱含量无显著差异.然而,中等强度(MU,10 μW/cm2)和高强度(HU,15 μW/cm2)UV-B辐射,明显增加硝态氮含量,谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、谷氨酸脱氢酶(glutamine dehydrogenase,GDH)活性明显高于对照.重要的是,中、高强度UV-B辐射显著降低了颠茄的叶片与茎中莨菪碱和东莨菪碱含量.荧光定量PCR揭示,莨菪碱合成的关键酶腐胺N-甲基转移酶(putrescine N-methyhransferase,PMT)编码基因、莨菪碱-6-β-羟化酶(hyoscyamine-6-β-hydroxylase,H6H)基因表达呈高度组织特异性,主要是在根部表达.与对照比较,低强度照射25 d引起pnt在根部的表达量显著上调,而中、高强度照射导致其下调;h6h在根部的相对表达量随着处理强度的增加逐渐降低;托品酮还原酶Ⅰ (tropinone reductase Ⅰ,TRⅠ)编码基因在叶片中的表达量较高,随照射强度的增加而升高.上述结果表明,低强度UV-B辐射促进氮代谢,有利于莨菪碱合成;而长期中、高强度UV-B辐射,尽管促进了谷氨酸代谢,但却使pmt 和h6h表达降低,不利于莨菪碱和东莨菪碱的积累.总之,本研究结果显示,不同UV-B辐射强度和时间,对颠茄合成TAs的影响不同,可为大田试验生产莨菪碱提供有益的参考.
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