摘要Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是危害人类健康的常见病原体之一,能够通过受损皮肤或黏膜感染宿主细胞并引起多种疾病.HSV-1的侵入激活先天免疫模式识别受体,诱导干扰素B(IFN-β)的产生,通过表达干扰素刺激基因(ISG)发挥抗病毒功能.近年来,干扰素诱导的四肽重复蛋白1(IFIT1)在病毒感染过程中的作用引起了广大研究者的关注.然而,其具体机制尚未完全清楚.本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了小鼠成纤维细胞(L929)IFIT1敲除细胞株,免疫印迹方法检测敲除细胞株IFIT1在蛋白质水平的表达.转染HT-DNA和Poly[I:C]刺激L929 WT和IFIT1敲除细胞株,实时定量PCR技术检测发现,HT-DNA刺激敲除细胞时,IFN-B及下游ISGs的表达量显著升高.IFN-β的表达量比L929-WT组平均高出13.4倍,IFIT1和趋化因子10(CXC chemokineligand-10,CXCL10)的表达量比L929 WT组分别平均高出6.7倍和21倍(P＜0.001),而Poly[I∶C]刺激无明显变化(P＞0.05),表明IFIT1是通过DNA信号通路来行使其负反馈调节作用.为研究IFIT1基因的抗病毒作用,利用CRISPR/Cas9技术改造的HSV-1-VP26-mCherry病毒感染该敲除细胞株,通过测定病毒荧光数及病毒拷贝数,发现IFIT1敲除细胞株与L929 WT细胞相比,存活率提高了60％ (P＜0.001),病毒增殖能力在48 h后降低28.6倍(P＜0.001).该结果表明,IFIT1基因的缺失有利于抵抗HSV-1的感染.综上所述,IFIT1通过DNA信号通路负反馈上调IFN-β及ISG的表达,IFIT1的缺失对病毒入侵发挥了保护作用.该结果为后续研究开发治疗HSV-1感染相关的治疗药物提供了一个新思路.