换一批基于CRISPR/Cas9技术创制高维生素C番茄材料
Enriching Vitamin C in Tomato Fruits by CRISPR/Cas9-Mediated SlCSN5B Gene Editing
摘要组成型光形态建成9信号复合体的5B亚基(subunit 5B of constitutively photomorphogenic 9 signalosome,CSN5B)是植物中L-半乳糖途径合成维生素C的抑制因子.为了获得高维生素C番茄突变体,本文构建双靶点载体pKSE402-SlCSN5B并对番茄育种亲本"1912"进行了遗传转化.通过分子生物学鉴定和DNA序列分析,17株转基因阳性植株中6株发生编辑,编辑效率为35.3％;其中csn5b-6和csn5b-8为纯合突变体,分别缺失了 180 bp和3bp.对这2种缺失纯合体T1代中无外源T-DNA插入的株系分别进行生物学观测,在植株和果实的表型上无明显差异;在果实红熟期,对其进行生理指标测定,csn5b-6的T1代株系在GMPase活力、维生素C和过氧化氢含量变化显著,分别比野生型提高43％、37.8％和降低25.9％,而可溶性固形物含量无明显差异;csn5b-8的T1代株系与野生型一致.采用基因表达分析和蛋白质结构预测发现,csn5b-6-11中SlCSN5B基因表达量正常,但其编码的蛋白质由于较大的肽段丢失引起结构的改变,从而影响其功能,这可能是引起维生素C含量提高的原因.以上结果表明,利用CRISPR/Cas9技术编辑SlCSN5B基因可以提高番茄果实中维生素C的含量,为后续培育优质番茄新品种提供材料.
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关键词
CRISPR/Cas9番茄SlCSN5B维生素Cclustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated(Cas)sys-tems 9(CRISPR/Cas9)tomatogene encoding subunit 5B of constitutively photomorphogenic 9 signa-losome in tomato(SlCSN5B)vitamin C(Vit C)
栏目名称
DOI
10.13865/j.cnki.cjbmb.2025.01.1412
发布时间
2025-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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