换一批摘要核酸检测技术因快速、灵敏和特异等特点,在病原体检测等领域广泛应用.因疾病相关的核酸标志物众多,多重核酸检测需求渐增.多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)可对多种靶标同时扩增,但扩增后分析过程存在开管易污染和技术要求高等问题.随着检测技术的不断进步,一系列简便和可靠且无需开管处理的单管多重PCR检测技术相继出现.常见的技术有基于荧光探针的单管闭管多重PCR检测方法,主要利用不同荧光标记对多种靶标进行区分,与不同的特异性酶切反应结合,能够实现肿瘤罕见突变的多重检测以及单核苷酸特异性分型.此外,基于熔解温度差异的单色熔解曲线分析方法,在单个荧光通道内实现了多靶标并行检测,若在多个荧光通道内进行则称为多色熔解曲线分析方法,可将检测靶标数量提升至数十种,显著突破了荧光通道数量对检测重数的限制.同时,利用荧光标记进行不同组合的荧光编码方法,也为单管闭管多重PCR检测提供了新的思路,包括编码同一靶标对应的不同荧光标记产生信号的先后顺序、利用2种荧光标记组合识别特定靶标、控制不同靶标荧光信号幅度等方式,也能够提高检测重数.本文从原理、应用及方法优缺点等多个维度出发,对近年来单管闭管多重PCR检测技术的研究进展进行概括并展望,为此后的科研探索与应用提供有价值的参考.
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关键词
核酸检测多重核酸检测聚合酶链式反应单管反应检测方法nucleic acid detectionmultiplex nucleic acid detectionpolymerase chain reaction(PCR)single-tube reactiondetection method
分类号
Q7（分子生物学）
栏目名称
DOI
10.13865/j.cnki.cjbmb.2025.04.1101
发布时间
2025-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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