蒺藜苜蓿异黄酮合成酶的新颖结构特征揭示其独特的酶促机制
Novel Structural Features of Isoflavone Synthase from Medicago truncatula Shed Light on Its Unique Enzymatic Mechanism
摘要异黄酮主要分布于豆科植物中,具有丰富的保健功效.异黄酮合成酶(IFS)是一种膜结合细胞色素P450酶(P450),催化独特的芳环迁移和羟基化.到目前为止,研究得到的植物P450酶晶体结构数量有限.通过培养硒代蛋氨酸取代晶体,利用MAD方法测定了蒺藜苜蓿IFS分辨率为1.9 ?的晶体结构,并进行了分子对接和突变研究.结合咪唑的IFS结构具有Ⅰa螺旋-环-iβ螺旋基序,与其他P450酶的螺旋Ⅰ相对应.与常见的P450结构相比,IFS/咪唑复合物结构包含1个额外的结构域,即γ-结构域.IFS/咪唑复合物结构是一种同源二聚体,其中一个分子的γ-结构域与另一个分子的β-结构域发生作用.血红素基团平面与Ⅰa螺旋-环-Ⅰβ螺旋基序形成约40°的夹角.分子对接和突变研究表明,Trp-128和Asp-300可能在底物结合和识别中发挥重要作用.来自Ⅰa螺旋-环-Ⅰβ螺旋基序的Phe-301、Ser-303和Gly-305可能在芳环迁移中发挥重要作用.这些新颖的结构特征揭示了 IFS独特的反应机制,为在豆科作物中进行IFS育种工程奠定了基础.
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