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全沟硬蜱防御素IpDf3的制备与抗菌活性

Preparation and Antibacterial Activity of the Defensin IpDf3 from Ixodes persulcatus

摘要蜱通过吸血传播多种病原体,对全球公共卫生和人类健康构成严重威胁.然而,蜱在接触大量病原体的过程中自身却能免受感染,暗示其体内可能富含防御病原体的特殊活性物质.通过生物信息学分析,本文从全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)基因组数据库中注释到1 个新型防御素基因 Ip-Df3,并借助大肠杆菌重组融合蛋白质表达、亲和层析、小肠激酶酶切、RP-HPLC 高效液相色谱等方法成功制备该多肽,用以后续验证其功能.抗菌实验表明,重组全沟硬蜱防御素 Ox-IpDf3(氧化型IpDf3)对4 种革兰氏阳性菌和2 种革兰氏阴性菌均具有不同程度的抗菌活性,特别是对金黄色葡萄球菌(S.aureus AB94004)和表皮葡萄球菌(S.epidermidis AB208188)的抗菌作用尤为明显.同时,DTT 处理和点突变半胱氨酸残基显著降低 Ox-IpDf3 抗菌活性,说明 Ox-IpDf3 多肽中分子内二硫键对其抗菌活性的发挥十分关键.杀菌动力学和扫描电镜结果表明,Ox-IpDf3 能导致细菌表面出现不规则凸起或凹陷,甚至细胞膜的破裂,说明其抗菌机制可能与细胞膜的直接损伤密切相关.综上,这些研究有助于理解全沟硬蜱防御素的抗菌特性及其生理功能.

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中国生物化学与分子生物学报

中国生物化学与分子生物学报

2026年42卷2期

269-279页

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