蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解及体外生物相容性的研究

Study on the in vivo Degradation and in vitro Biocompatibility of Spider Silk Protein Composite Material Small Diameter Vascular Scaffold

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摘要探讨蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解性能和生物相容性,为其临床应用奠定基础.通过静电纺丝仪,将RGD-重组蛛丝蛋白(pNSR16)、聚己内酯(PCL)、明胶(Gt)、壳聚糖(CS)共混形成的纺丝液进行电纺,制得(pNSR16/PCL/CS)/(pNSR16/PCL/Gt)支架,并将其植入SD大鼠腿部肌肉中,通过肉眼外观观察、组织切片HE染色评价等方法,评价蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解情况.分析支架浸提液对间充质干细胞集落形成、细胞分裂指数、台盼蓝拒染率、细胞毒性和细胞周期的影响,评价血管支架的生物相容性.血管支架在整个植入期内不断降解,(pNSR16/PCL/CS)/(pNSR16/PCL/Gt)支架降解程度更深,纤维断裂严重,12周时失重率为20.3％,其降解速度明显快于(PCL/CS)/(PCL/Gt)支架,后者在12周时仅降解了13.2％.在(pNSR16/PCL/CS)/(pNSR16/PCL/Gt)支架浸提液培养条件下的大鼠骨髓MSC集落生成率、平均集落面积和分裂指数都显著高于(PCL/CS)/(PCL/Gt)支架组.血管支架毒性等级均低于1级,无细胞毒性.与血管支架浸提液复合培养的MSC生长状态良好,台盼蓝拒染率高于95％,复合培养48 h后,细胞Go/1期比例降低,S、G2/M期比例均升高.蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解和生物相容性良好,应用于临床具有一定的可行性.