骨髓间充质干细胞复合海螵蛸支架的部分生物学安全性评估

Safety Assessment of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells-Cuttlebone Composite Scaffold

二维码有效期 120s

摘要制作与鉴定自体兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架,进行生物学安全性评估.采用密度梯度离心联合贴壁筛选法,体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs);采用沉淀法,构建BMSCs-海螵蛸复合支架;通过电镜扫描及MTT试验,对复合支架进行检测.选取40只新西兰兔,分两组分别植入BMSCs-海螵蛸复合支架(试验组)或海螵蛸支架(对照组),通过肌肉植入试验评估复合支架的生物学安全性.密度梯度离心联合贴壁筛选分离培养出于细胞,其免疫细胞化学检测表面抗原CD29(+).电镜扫描测得海螵蛸支架孔隙率为81.730％±6.770％.扫描电镜下见细胞黏附于海螵蛸支架爬行生长,分泌胞间基质.MTT检测:复合培养第1、3、5、7天之间吸光值两两比较,均有显著性差异(P＜0.05),细胞呈逐渐增殖趋势;第7、8天比较无显著差异,表明第8天细胞无明显增殖.肌肉植入试验的血常规、血生化检测,复合支架组(试验组)与海螵蛸组(对照组)检测结果无显著差异,复合支架的各项指标达标.病理切片:第7天,试验组与对照组的组织炎症反应为Ⅲ ～ Ⅳ级;第14天,二者的组织炎症反应为Ⅱ ～ Ⅲ级;第28天,二者的组织炎症反应为Ⅰ～ Ⅱ级;第56天,二者的组织炎症反应为0～Ⅰ级:均符合肌肉植入试验结果评定标准.自体BMSCs能与中药海螵蛸联合培养构建复合支架,支架上的细胞数量随培养时间延长而增多,第7天时达增殖高峰.研究表明,此复合支架的组织相容性良好,符合生物材料的应用要求.