换一批
换一批人乙酰胆碱酯酶(AchE)cDNA克隆及真核表达载体的构建
Cloning of Human Acetylcholinesterase (AchE)cDNA and Construction of Eukaryotic Expression Vector
摘要目的克隆人乙酰胆碱酯酶(AchE)cDNA并构建真核表达载体.方法根据Gene Bank中hAchE核苷酸序列,设计并合成1对特异性扩增hAchE的引物,从18周龄引产的胎儿大脑组织中提取RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增出hAchEcDNA片段,并与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌DHSα中,经IPTG/X-gal诱导培养,筛选白斑提取重组载体,经酶切和PCR鉴定及序列测定与分析,并构建hAchE真核表达载体pcDNA3.1(+)-hAchE.结果已克隆的hAchE cDNA片段全长约1.9kb,其测序结果与基因文库中的人乙酰胆碱酯酶cDNA序列相符.结论在国内首次利用RT-PCR成功地克隆了hAchE cDNA全长,并构建了hAchE真核表达载体pcDNA3.1(+)-hAchE,为进行hAchE的结构与相关功能研究和基因工程生产奠定了基础.
更多相关知识
- 浏览189
- 被引4
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
