换一批
换一批人TRAIL细胞外段基因在大肠杆菌中的表达及其包涵体的复性
Expression of Extracellular Domain Gene of Human TRAIL in E. coli and Re naturalization of Inclusion Body
摘要目的在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)基因,并研究其包涵体的复性.方法应用RT-PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,于大肠杆菌DH5α中通过温控诱导表达;将包涵体进行变性和复性处理后,采用离子交换层析纯化表达产物,并经Dot blot及MIT试验鉴定.结果通过温度诱导,目的基因主要以包涵体形式高效表达,包涵体蛋白经梯度透析法复性可获得具有抗肿瘤活性的重组人sTRAIL.结论已获得大量纯化重组人sTRAIL,为开发新型抗肿瘤制剂奠定基础.
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栏目名称
基础研究
DOI
10.3969/j.issn.1004-5503.2005.02.011
发布时间
2005-05-12
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