换一批人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)的真核表达、纯化及活性鉴定
Eukaryotic Expression, Purification and Activity of Recombinant Human Vasostatin ( 120 ～ 180aa )
摘要目的 利用毕赤酵母表达系统表达人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa),经纯化后,观察其抑制血管内皮细胞增殖的活性.方法 采用PCR技术扩增出人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)的全长cDNA序列,将其克隆至真核表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母KM71,以甲醇诱导表达,并进行Western blot检测及金属螯合层析纯化.采用MTT法检测纯化的血管抑制因子对血管内皮细胞增殖的抑制作用.结果 重组表达质粒pPIC9K-Vasostatin(120～180aa)经菌落PCR、酶切和测序鉴定,证明构建正确.经Western blot检测可见一条特异条带,纯化后的蛋白纯度达88.76%,浓度为300 μg/ml,在体外可抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖.结论 人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)可在毕赤酵母中以分泌形式表达,并具有抑制血管内皮细胞增殖的活性.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1004-5503.2007.10.004
发布时间
2007-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
黑龙江省教育厅科学技术研究项目（11521164）
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