固定化胰蛋白酶制备条件的优化及其在纯化抑肽酶中的应用
Optimization of Condition for Immobilization of Trypsin and Application of Immobilized Trypsin in Purification of Aprotinin
摘要目的 优化固定化胰蛋白酶的制备条件,并探讨固定化胰蛋白酶在纯化抑肽酶中的应用.方法 以介孔分子筛SBA-15作为载体,戊二醛作为交联剂,对胰蛋白酶进行固定化,并对固定化条件进行优化.将优化条件制备的固定化胰蛋白酶作为亲和吸附剂,对抑肽酶进行分离纯化.结果 固定化胰蛋白酶制备的最适条件为:戊二醛浓度0.8%,加酶量3.0 mg,反应温度35℃,反应时间3 h.以此条件制备的固定化胰蛋白酶活力可达15.6 U/mg.以此酶作为亲和吸附剂纯化抑肽酶,纯化倍数可达420倍以上,活性回收率超过80%.结论 优化了固定化胰蛋白酶的制备条件,以此酶作为亲和吸附剂用于抑肽酶的分离纯化,效果较好.
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