换一批
换一批质粒DNA中宿主菌基因组DNA残留检测方法的比较
Comparison of Two Methods for Determination of Residual Host Genomic DNA in Plasmid DNA
摘要目的 对检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA含量的Southern blot和Real-time PCR法进行比较.方法 PCR扩增宿主菌染色体DNA的16SrRNA片段,以地高辛标记回收的目的 片段为探针,对提取的质粒pcDNAH进行Southern blot.同时根据16SrRNA基因序列设计探针,建立Real-time PCR反应体系和标准曲线,分别检测质粒中宿主菌基因组DNA的含量.结果 应用Southem blot和Real-time PCR检测质粒peDNAH中宿主菌基因组DNA的含量,结果均符合WHO相关标准.结论 两种检测方法各有优缺点,均可用于检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA的残留,可根据不同情况,采用不同方法或配套使用.
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