中华绒螯蟹组织蛋白中变应原组分的分析与提取
Analysis and Extraction of Allergic Components in Tissue Protein of Eriocheir sinensis
摘要目的 对中华绒螯蟹组织蛋白中的变应原组分进行分析鉴定和分离提取,为研制蟹类食物过敏反应的检测试剂和脱敏制剂奠定基础.方法 中华绒螯蟹粗提蛋白经SDS-PAGE分离,用蟹过敏症患者血清经Western blot分析其变应原组分.粗提蛋白经硫酸铵分段盐析和DEAE-52离子交换层析,分离提取中华绒螯蟹的主要变应原成分,并用蟹过敏症患者血清对层析产物进行ELISA分析.结果 SDS-PAGE分析显示,中华绒螯蟹粗提蛋白有20多条可辨蛋白带,相对分子质量在15 700~1 18 000之间.Western blot分析显示,7份蟹过敏患者血清与粗提蛋白均呈阳性反应,主要有9条反应带.其中相对分子质量为35 000、41 000、48 000和66 000的4条蛋白带与7份患者血清均呈阳性反应.经DEAE-52离子交换层析分离后,变应原主要出现在30%盐析段0.2mol/L洗脱峰、50%盐析段0.2和0. 4mol/L洗脱峰、70%盐析段0. 2和0. 3mol/L洗脱峰、90%盐析段0. 2mol/L洗脱峰内.结论 中华绒螫蟹组织蛋白中的相对分子质量为35 000、41 000、48 000和66 000的组分是其主要变应原.
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