换一批重组人成纤维细胞生长因子-21的表达及纯化工艺的优化
Optimization of Procedure for Expression and Purification of Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-21
摘要目的 优化重组人成纤维细胞生长因子-21(SUMO-rhFGF-21)融合表达工程菌的表达条件及目的蛋白纯化工艺.方法 对工程菌的诱导温度、时间及诱导剂浓度进行优化,并进行罐发酵,对菌体裂解液进行离子交换层析、Ni离子亲和层析及分子筛层析等.纯化产物经SDS-PAGE和HPLC鉴定纯度.结果 在诱导温度为37℃,诱导时间为4 h,IPTG浓度为0.5 mmol/L时,目的蛋白的表达量最高,达20.5%;罐发酵收菌量可达66 g/L,目的蛋白的表达量达20.2%;纯化后的rhFGF-21纯度达96%以上.结论 优化了rhFGF-21的表达条件及纯化工艺.为rhFGF-21用于新药开发奠定了基础.
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关键词
重组人成纤维细胞生长因子-21SUMO融合表达纯化Recombinant human fibroblast growth factor-21(rhFGF-21)SUMOFusion expressionPurification
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发布时间
2010-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
吉林省科技厅项目（20080712）
长春净月开发区资助项日（2008B003）
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