换一批
换一批原核表达HPVl6L1蛋白的变性、纯化及复性效果评价
Denaturation,Purification and Renaturation of HPVl6 L1 Protein Expressed in Prokaryotic Cells and Evaluation on Renaturation Efficacy
摘要目的 探讨原核表达HPVl6 L1蛋白的变性、纯化及复性条件,并对复性效果进行评价.方法 将重组质粒PET28a-L1转化E.coli BL21(DE3).经放大培养诱导表达后,收集菌体.超声破碎后提取包涵体.并对其进行洗涤、变性,离子交换层析纯化,然后稀释复性.经电镜观察、红细胞凝集试验以及免疫原性分析,对复性效果进行评价.结果 LI蛋白在8 tool/L尿素中溶解不完全,SDS、硫脲和高pH值可提高其溶解度;纯化后的L1蛋白纯度可达90%;电镜可观察到VLP,并能凝集小鼠红细胞.免疫家兔后,可产生高滴度的抗体.结论 复性的HPVl6 LI蛋白在体外可自我折叠形成具有正确空间构象的VLP,且具有较好的免疫原性,为进一步研制HPVl6预防性疫苗及诊断试剂盒奠定了基础.
更多相关知识
- 浏览320
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
