换一批
换一批治疗用A型肉毒梭菌神经毒素全基因克隆及序列分析
Cloning and Sequencing of Complete BoNT Gene of Clostridium botulinum Type A for Therapy
摘要目的 对我国治疗用A型肉毒毒素生产用菌株Hall株神经毒素(BoNT)全基因进行克隆及序列分析,了解其遗传特性,为该制剂的质量控制提供依据.方法 取生产用主代种子、工作种子,通过PCR扩增BoNT全基因片段,将其克隆至载体pGEM-T中,构建重组克隆质粒pGEM-T-BoNT,对克隆的BoNT基因进行序列测定与分析.结果 测得的Hall株BoNT全基因序列3 891 bp,共编码1 297个氨基酸.4种核苷酸的比例分别为:A:40.58%,G:16.17%,T:33.13%,C:10.13%;GC含量为26.29%,AT含量为73.71%.主代种子、工作种子核苷酸序列3 591位的G变成A,为无义突变,未导致其推导的氨基酸的改变.序列测定结果 与GenBank中登录的Hall标准株进行比较,主代种子、工作种子核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为99.99%和100%.结论 A型肉毒梭菌Hall株在实验室长期的保存和生产传代过程中,BoNT基因遗传特性非常稳定.
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发布时间
2010-09-30
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