换一批
换一批脱氧胆酸钠酸沉淀法定量测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗中游离多糖的含量
Quantitative Determination of Free Polysaccharide Content in Haemophilus influenzae Type b Conjugate Vaccine by Acid Precipitation with Sodium Deoxycholate
摘要目的 建立一种b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合疫苗中游离多糖含量新的检测方法.方法 分别对标准蛋白溶液、多糖溶液和标加衍生多糖(A H-PRP)的结合物原液进行脱氧胆酸钠(NaDC)酸沉淀处理,观察该方法 对蛋白和多糖的沉淀效果.分别采用NaDC酸沉淀法和乙醇分步沉淀法测定结合疫苗原液中的游离多糖含量.结果 不同浓度的标准蛋白溶液经NaDC酸沉淀法处理后,沉淀中蛋白的回收率在96％～ 99％之间；不同浓度的多糖溶液经NaDC酸沉淀法处理后,上清中的多糖回收率在99％～106％之间；该方法 对结合物中的游离多糖能起到很好的分离效果；两种方法 测定结合疫苗原液中的游离多糖含量差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NaDC酸沉淀法能专一性地沉淀蛋白物质,对游离多糖无沉淀作用,该方法 具有良好的重复性和准确性,可用于测定Hib结合疫苗中的游离多糖含量.
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主题词
疫苗, 结合(Vaccines, Conjugate)脱氧胆酸(Deoxycholic Acid)钠(Sodium)流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)方法(Methods)
栏目名称
实验技术
发布时间
2011-12-13
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