换一批
换一批JTV1基因siRNA重组表达质粒的构建及其对K562细胞增殖的影响
Construction of siRNA expression vector for JTV1 gene and its effect on proliferation of K562 cells
摘要目的 构建JTV1基因siRNA重组表达质粒,转染K562细胞,鉴定其干扰作用.方法 人工合成靶向JTV1基因的siRNA干扰序列,克隆至载体pGeneSil-1上,构建重组表达质粒pGeneSil-1-JTV1-1.1 siRNA,转染人K562细胞,经G418稳定筛选后,采用RT-PCR及Western blot法分别检测重组表达质粒对K562细胞中JTV1基因转录和翻译的影响；MTT法检测抑制JTV1基因的表达对K562细胞增殖的影响.结果 重组表达质粒pGeneSil-1-JTV1-1.1 siRNA经测序证明构建正确；其转染K562细胞后,细胞JTV1基因的转录和翻译水平均明显降低；抑制JTV1的表达可促进K562细胞增殖.结论 已成功构建了pGeneSil-1-JTV1-1.1 siRNA质粒,并获得了稳定的JTV1基因表达受抑的K562细胞克隆,为进一步研究JTV1基因的功能及其与肿瘤的相关性奠定了基础.
更多相关知识
栏目名称
基础研究
发布时间
2012-04-20
基金项目
国家自然科学基金
国家中医药管理局
重庆医科大学课题
- 浏览105
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
