换一批
换一批高尔基体囊泡转运蛋白P115基因沉默对胃癌细胞凋亡的影响及其机制
Effect of Golgi body vesicular transporter P115 gene silencing on apoptosis of gastric cancer cells and relevant mechanism
摘要目的 探讨高尔基体囊泡转运蛋白P115基因沉默对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响及其可能的相关机制.方法 将含p115基因的重组质粒P115 shRNA-1318转染BGC-823细胞,并设shNC(阴性对照)转染组和空白对照组,免疫荧光显微镜检测转染效果；RT-PCR法检测细胞中p115和巨噬细胞游走抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)基因mRNA的转录水平；Western blot检测细胞中P115、MIF及核内肿瘤抑制蛋白质P53的表达水平；MTT法检测细胞的增殖活力；流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的分布.结果 转染后48 h,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,表明转染成功；与对照组相比,p115 shRNA-1318组细胞中的p115和MIF基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平均明显降低(P＜0.05),细胞核内P53蛋白的表达水平明显增加(P＜0.05),细胞的增殖活力明显下降(P＜0.05),细胞凋亡数量明显增加(P＜0.05),G1/C2期细胞数量明显增多,S期细胞数量明显减少(P＜0.05).结论 沉默p115基因可促进胃癌细胞的凋亡,其调控机制可能是通过调控MIF因子来完成的.
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