换一批牛病毒性腹泻病毒的体外培养及其多克隆抗体的制备
In vitro culture of bovine viral diarrhea virus and preparation of its polyclonal antibody
摘要目的 体外培养牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV),并制备其多克隆抗体.方法 制备牛肾原代细胞,并进行传代,建立细胞库.将BVD/MD Oregon C24毒种接种至牛肾细胞,进行体外传代,建立BVDV毒种库.按MOI=0.01将BVDV接种至牛肾细胞,制备BVDV病毒液,经Sepharose CL-2B凝胶柱纯化后,分别免疫家兔和健康海蓝白产蛋鸡,制备兔抗BVDV和鸡抗BVDV多克隆抗体,ELISA法测定效价.结果 牛肾细胞体外传至20代生长状态均良好,传代稳定.建立的BVDV毒种库的毒力达7.50 CCID50/mL,BVDV病毒液毒力达7.00 CCID50/mL以上,纯化后毒力达5.00 CCID50/mL以上.获得的兔抗BVDV和鸡抗BVDV多克隆抗体效价分别为1∶12800和1∶6 400.结论 体外成功培养了BVDV,制备的兔抗BVDV和鸡抗BVDV多克隆抗体效价较高,为BVDV检测试剂盒的研发奠定了基础.
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2018-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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