换一批一种抗人T淋巴细胞免疫球蛋白淋巴细胞毒效价检测方法的建立
Development of a method for determination of anti-human T lymphocyte immunoglobulin lymphocytotoxic titer
摘要目的 建立基于人白血病T细胞株Jurkat的抗人T淋巴细胞免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte immuno-globulin,ALG)淋巴细胞毒效价定量检测方法,并进行验证.方法 采用人Jurkat细胞作为靶细胞,抗人T细胞兔免疫球蛋白(商品名:Grafalon)作为待检样品,建立其淋巴细胞毒效价定量检测方法.优化反应体系,考察细胞培养密度、细胞代次对待检样品效价的影响,并对方法的精密度进行验证.结果 优化的反应体系组成为50 μL待检样品+50μL补体(1:5稀释)+50μL细胞(5×106个/mL);细胞传代密度为2×105个/mL传代培养72 h或3×105个/mL传代培养48 h用于效价测定最佳;当细胞生长状态较好且一致时,从Pl0到P25代次的细胞效价测定结果较一致.采用该方法板内重复测定待检样品效价,变异系数(CV)为6.32％,重复性良好;不同代次Jurkat细胞测定待检样品效价6次,CV为4.15％,中间精密度良好.结论 建立了一种便捷、精确的测定ALG淋巴细胞毒效价的定量检测方法,为ALG效价测定提供了一种客观、准确的评价手段.
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