甲基化转移酶3对食管癌细胞增殖、迁移及谷氨酰胺代谢的影响

Effect of methyltransferase like-3 on proliferation,migration and glutamine metabolism of esophageal cancer cells

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摘要目的探讨甲基化转移酶3(methyltransferase like-3,METTL3)在食管癌中的表达及其对细胞增殖、凋亡、迁移和谷氨酰胺代谢的影响.方法采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化法检测食管癌组织及其癌旁组织中METTL3基因的表达;CCK8试验、克隆形成试验、划痕试验和Transwell试验检测METTL3抑制剂STM2457对人食管鳞状癌细胞系Eca1 09和KYSE150增殖及迁移的影响;流式细胞术、TUNEL染色试验检测其对细胞周期及凋亡的影响;TMT/iTRAQ定量蛋白质组法分析其对下游相关信号通路的影响;谷氨酰胺和谷氨酸检测试验及Western blot法分析其对食管癌细胞谷氨酰胺代谢的影响.结果 METTL3在食管癌组织中的表达显著上调(t=5.024,P＜0.000 1).STM2457抑制Eca109和KYSE150细胞的METTL3表达后,显著抑制了细胞的增殖及迁移能力,细胞周期在G0/G1期发生阻滞,细胞凋亡率增加,同时降低了谷氨酰胺摄取量和谷氨酸生成量,并下调了谷氨酰胺代谢相关蛋白丙氨酸-丝氨酸-半胱氨酸转运载体2(alanine-serine-cysteine transporter 2,ASCT2)、谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)和谷氨酸脱氢酶1(glutamate dehydrogenase 1,GLUD1)的表达.METTL3敲低后,Eca109和KYSE150细胞中谷氨酰胺摄取量和谷氨酸生成量显著降低(谷氨酰胺摄取量:t为24.52～41.01,P均＜0.01;谷氨酸生成量:t为8.431～11.83,P均＜0.01);METTL3过表达后,Eca109和KYSE150细胞中谷氨酰胺摄取量和谷氨酸生成量显著升高(谷氨酰胺摄取量:t分别为5.803和56.13,P均＜0.01;谷氨酸生成量:t分别为11.06和4.695;P均＜0.01).METTL3敲低后,Eca109和KYSE150细胞中谷氨酰胺代谢相关蛋白ASCT2、GLS和GLUD1表达水平显著下调,而METTL3过表达后,ASCT2、GLS和GLUD1蛋白表达水平显著上调.结论 METTL3在食管癌中高表达,并可能通过介导食管癌细胞谷氨酰胺代谢促进细胞增殖.

作者 高川力 ^[1] 周锡 ^[2] 邹江 ^[3] 杨密渊 ^[2] 文继林 ^[2] 袁梓纯 ^[2] 王琴 ^[2] 徐磊 ^[3] 马强 ^[4] 钟晓武 ^[4] 郭晓兰 ^[4] 学术成果认领

作者单位 川北医学院附属医院检验科,四川南充 637000;川北医学院检验医学院,四川南充 637007 ^[1] 川北医学院检验医学院,四川南充 637007 ^[2] 川北医学院转化医学研究中心,四川南充 637007 ^[3] 川北医学院附属医院检验科,四川南充 637000;川北医学院检验医学院,四川南充 637007;川北医学院转化医学研究中心,四川南充 637007 ^[4]

关键词食管癌甲基化转移酶3 STM2457 谷氨酰胺代谢 Esophageal cancer Methyltransferase like-3(METTL3)STM2457 Glutamine metabolism

分类号 R735.1

栏目名称 基础研究

发布时间 2024-06-06

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